时辰：2023-03-21 17:15:20
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良多药物都有细胞毒性，在杀死病毒细胞的同时，也会对浅显细胞构成毁伤。是以，抱负的药物载体不只应有较好的生物相容性、较高的载药率，还应具备靶向性，即到达目标病灶部位才开释药物份子。无机纳米资料的巨细和外表的电荷等理化性子决议了纳米资料的机能，研讨这些可控特色可操纵在生物医学范畴中。比方，用多孔硅作为药物载体递送柔红霉素，医治视网膜疾病延续时辰从几天耽误到3个月。经由进程调控将纳米粒子孔径从15nm变为95nm，使柔红霉素的开释率增大了63倍，从而调控药物的开释。用介孔二氧化硅纳米粒子运载化疗药物、探针份子向肿瘤细胞停止递送，可用于癌症等疾病的靶向性医治和初期诊断。介孔二氧化硅在药物传输、靶向给药、基因转染、构造工程、细胞示踪、卵白质牢固与分手等方面有普遍的操纵。碳纳米管及其衍生资料可开辟用于电敏感的透皮药物开释，又可作药物载体停止延续性开释。比方，用超支化聚合物润色碳纳米管，能够或许或许或许从复合物的羟基结尾堆积活性基团，从而加强消融机能，作为抗癌的药物载体，也能够或许或许或许用作药物缓释载体。用聚乙烯亚胺润色多壁碳纳米管，分手性好，能降落对细胞的毒性，进一步连系在壳聚糖/甘油磷酸盐上，能增添凝胶的机械强度。同时，转变溶液的pH值、温度等来构建具备双缓释功效的温敏性凝胶，能削减凝胶的突释景象。纳米钻石（dND）装载化疗药物具备较低的毒性和较高的生物兼容性。将叶酸等靶向份子润色纳米钻石外表，用于装载抗癌药物，以H2N-PEG-NH2作为桥梁份子，构成纳米靶向载药体系，对C6细胞具备靶向感化，为研制肿瘤靶向医治供给了参考按照。为了防止被单核细胞、巨噬细胞体系等非特同性接收，并让药物优先进入肿瘤细胞，用超支化缩水甘油（PG）润色纳米钻石获得dND-PG，有较好的生物相容性，能防止被浅显细胞的巨噬细胞非特同性摄取。加载抗癌药物阿霉素显现出对肿瘤细胞具备挑选性的毒性感化，可作为肿瘤药物载体，对肿瘤细胞停止挑选性给药。将药物份子拔出LDHs的层间构成药物-LDHs的纳米杂化物，药物与LDHs层间的彼此感化和空间位阻效应能有用地节制药物开释，削减药物产生酶解感化。LDHs外表存在大批的羟基，便于停止外表功效化润色，加强靶向性，防止被巨噬细胞吞噬而从人体内断根，进步药物的保送效力。LDHs合适装载差别典范的药物，将药物拔出到LDHs的层间计划，药物以阴离子情势装载并被控释。经由进程共积淀法在LDHs层间胜利地嵌入维生素C，维生素C的阴离子垂直插于LDHs层间，热不变性较着加强。经由进程离子互换反应来开释维生素C，耽误开释时辰。
1.2卵白质载体
纳米资料在诊断、药物保送、生物功效资料、生物传感器等方面获得了迅猛的成长，显现了疾病医治、诊断、造影成像等多种功效的组合。无机纳米资料在生物大份子药物的载体，包罗运载卵白质、多肽、DNA和siRNA等方面的研讨较多。纳米多孔硅有较好的生物相容性、生物可降解性和可调控的纳米粒径，可作为药物保送体系。壳聚糖润色多孔硅后可用于运载口服给药的胰岛素，改进胰岛素的跨细胞渗入，增添与肠道细胞粘液层的外表打仗，进步细胞的摄取，可用于口服递送卵白质和多肽。纳米羟基磷灰石与卵白质份子有高亲和性，可用作卵白质药物缓释载体，能供给钙离子，构成肿瘤细胞过分摄取，从而按捺肿瘤细胞活性，引诱肿瘤细胞凋亡。
1.3基因载体
基因医治是遗传性疾病的临床医治战略，首要依靠于成长多样性的载体。无机纳米资料用于基因疗法是操纵无机粒子和可生物降解的多聚阳离子分解新型的纳米药物载体，如介孔二氧化硅作为基因载体可用于肿瘤医治，增进体外siRNA的递送。乙醛润色的胱氨酸具备本身荧光的特色，可对pH值和谷胱甘肽停止呼应。经由进程荧光标记类树状大份子的二氧化硅纳米载体具备分级的孔隙，不只毒性低、基因装载率高，转染率也较高。激起谷胱甘肽二硫键裂解，可增进质粒DNA（pDNA）开释，并能操纵自觉荧光来实时示踪。又如，经由进程π-π共轭、静电感化等非共价键感化力连系，能将DNA、RNA等生物大份子和化学药物牢固在氧化石墨烯上。
1.4骨移植
临床上可用自体骨移植来医治创伤、传染、肿瘤等构成的骨缺损，因为骨移植的来历无限，且手术时辰长，易致使失血过量和供骨区并发症等，操纵遭到限制。将异体骨用作骨移植，则存在免疫排挤反应，且易被传染。而野生骨同自体骨有四周的疗效，野生骨资料可接纳钛、生物陶瓷、纳米骨、3D摹拟野生骨髓等纳米资料。比方，纳米二氧化硅可替换骨构造，增进野生植入资料与肌肉构造融会。纳米羟基磷灰石与人体内的无机成份近似，其粒子有小尺寸效应、量子效应及外表效应等，可用作牙莳植体或作为骨骼资料，能防止产生排挤反应，增进血液轮回，增进人体骨构造的修复、整合和骨缺损后的治愈。
1.5临床诊断和医治
磁性氧化铁纳米粒子可作为造影剂用于肿瘤诊断中，对肿瘤份子产生磁共振份子影象或多模态肿瘤份子影象，也可用于轮回肿瘤细胞的分手、富集。免疫磁分手腕基于磁性杂化资料可导电，在外部磁场下堆集，可用于临床热疗。磁热疗以磁流体情势进入肿瘤构造，操纵肿瘤细胞与浅显细胞之间差别的热敏感度，将外部磁场产生的磁能转化成热能从而杀死肿瘤细胞。磁性纳米粒子还可用于生物传感器中，操纵磁景象和纳米粒子从液相平分手并捕获生物份子。用绿色荧光卵白标记，构成温敏的磁性纳米固相生物传感器，用磁性资料制成固相生物传感器的支架，在磁场感化下，呼应更快，外表易于更新，可用于免疫诊断。磁性纳米氧化铁作为临床操纵的磁性纳米资料，遭到人们的普遍存眷。Fe3O4和γ-Fe2O3的出格磁性子使其在靶向肿瘤药物载体、磁疗、热疗、核磁共振成像、生物分手等生物医学范畴中得以操纵。用无机纳米资料建造激起荧光探针停止临床诊断，如用介孔二氧化硅制成的细胞荧光成像探针操纵量子点杰出的光不变性、较长的荧光寿命和较高的生物相容性，连系介孔二氧化硅可特同性地辨认Ramos细胞的特色，并用激光共聚焦显微镜对Ramos细胞停止荧光成像，实现了对肿瘤细胞的初期诊断、检测成像。富勒烯出格的计划和性子使其能够或许或许或许普遍地操纵于光热医治、辐射化疗、癌症医治等医学范畴，也可作为核磁共振成像的造影剂用于临床诊断。但富勒烯不溶于水，对生物体存在潜伏的毒性，限制了其在临床的操纵。富勒烯连系含羟基的亲水性份子可改进其消融性，羟基化富勒烯无较着毒性，可作为抗氧化剂。聚羟基富勒烯操纵近红外光激活体内的纳米资料，用光热对肿瘤细胞定位，防止了金纳米粒子、碳纳米管等在体内构成堆积，操纵免疫安慰感化来按捺肿瘤细胞的转移、成长，从而减小肿瘤的尺寸，终究构成肿瘤细胞凋亡。是以，革新碳纳米计划，在成像、吸附、药物装载与靶向运输等生物医学工程方面有潜伏的操纵代价。银纳米粒子杀菌活性远高于银离子，在杀菌抑菌方面获得普遍的操纵，可用于内科手术中的伤口愈合、药学、性命迷信等生物和临床医学范畴。金纳米粒子有较好的生物相容性，功效化的金纳米粒子可用于生物阐发、药物检测、临床诊断等生物医药范畴，可作为纳米探针检测重金属离子、三聚氰胺等小份子，也可检测DNA、卵白质等生物大份子，还能够或许或许或许用于对细胞外表和细胞外部的多糖、核酸、多肽等的切肯定位。镍纳米粒子牢固在海藻酸水凝胶中，经由进程热敏感粒子与镍磁纳米粒子交联构成囊状计划，构成热磁双敏感的磁性纳米粒子。在交变磁场下迟缓开释水凝胶中的镍纳米粒子，经由进程长途调控来激起水凝胶中成纤维细胞的凋亡。无机纳米资料的种别差别，在尺寸、描摹上有很大的变更规模，因其焦点资料的量子特色，已日益成为触及临床诊断、成像和医治的手腕，为纳米资料在生物医学上的操纵供给更多的能够或许或许或许。
2瞻望
纳米手艺作为新时期的疾病医治情势，为将来的临床用药供给了新的能够或许或许或许，在生物医学的操纵上有很大的远景。今朝，癌症医治首要包罗手术、放疗和化疗等手腕，而药物剂量增添会构成副感化。纳米粒子能够或许或许或许作为靶向药物载体、成像造影剂、化疗、热疗、磁疗体系，可经由进程血脑樊篱，在医治神经体系疾病中有很大的潜力，无望成为霸占癌症的老手腕。无机纳米资料在药物载体、临床诊断和医治等方面有广漠的操纵远景，但今朝的研讨大多处于测验测验阶段。无机纳米资料在生物医学操纵中有待处置的标题标题标题标题标题题目包罗：
（1）进步疾病医治的针对性、靶向性和可调控性；
（2）使无机纳米资料绝对牢固在肿瘤细胞外表，不至于分手到浅显构造，从而进步肿瘤部位的有用浓度，削减毒副感化；
（3）纳米资料有潜伏的毒性，可降落纳米资料的毒副感化以到达临床操纵的规范；
（4）寻觅优良资料，优化计划，进步资料的生物相容性、生物宁静性，并针对差别的药物消融性假想特定的载体和功效资料骨架，增添细胞的摄取和操纵；
关头词：纳米资料生物医学操纵
1操纵于生物医学中的纳米资料的首要典范及其特色
1.1纳米碳资料
纳米碳资料首要包罗碳纳米管、气相成长碳纤维也称为纳米碳纤维、类金刚石碳等。
碳纳米管有怪异的孔状计划［1］，操纵这一计划特色，将药物贮存在碳纳米管中并经由进程必然的机制激起药物的开释，使可控药物变为现实。别的，碳纳米管还可用于复合资料的加强剂、电子探针（如察看卵白质计划的AFM探针等）或显现针尖和场发射。纳米碳纤维凡是是以过渡金属Fe、Co、Ni及其合金为催化剂，以低碳烃类化合物为碳源，氢气为载体，在873K～1473K的温度下天生，具备超凡特色和杰出的生物相溶性，在医学范畴中有普遍的操纵远景。类金刚石碳（简称DLC）是一种具备大批金刚石计划C—C键的碳氢聚合物，能够或许或许或许经由进程等离子体或离子束手艺堆积在物体的外表构成纳米计划的薄膜，具备优良的生物相溶性，出格是血液相溶性。资料报道，与其余资料比拟，类金刚石碳外表对纤维卵白原的吸附程度降落，对白卵白的吸附加强，血管内膜增生削减，是以类金刚石碳薄膜在血汗管临床医学方面有首要的操纵代价。
1.2纳米高份子资料
纳米高份子资料，也称高份子纳米微粒或高份子超微粒，粒径规范在1nm～1000nm规模。这类粒子具备胶体性、不变性和优良的吸附机能，可用于药物、基因通报和药物控释载体，和免疫阐发、到场性诊疗等方面。
1.3纳米复合资料
今朝，研讨和开辟无机—无机、无机—无机、无机—无机及生物活性—非生物活性的纳米计划复合资料是获得机能优良的新一代功效复合资料的新路子，并渐渐向智能化标的目标成长，在光、热、磁、力、声［2］等方面具备奇特的特色，是以在构造修复和移植等良多方面具备广漠的操纵远景。外洋已制备出纳米ZrO2增韧的氧化铝复合资料，用这类资料制成的野生髋骨和膝盖植入物的寿命可达30年之久［3］。研讨标明，纳米羟基磷灰石胶原资料也是一种构建构造工程骨较好的支架资料［4］。别的，纳米羟基磷灰石粒子制成纳米抗癌药，还可杀死癌细胞，有用按捺肿瘤成长，而对浅显细胞构造涓滴无损，这一研讨功效激起国际的存眷。北京医科大学等权势巨子机构经由进程生物学测验测考证实，这类粒子可杀死人的肺癌、肝癌、食道癌等多种肿瘤细胞。
别的，在临床医学中，具备较高操纵代价的另有纳米陶瓷资料，微乳液等等。
2纳米资料在生物医学操纵中的远景
2.1用纳米资料停止细胞分手
操纵纳米复合体机能不变，浅显不与胶体溶液和生物溶液反应的特色停止细胞分手在医疗临床诊断上有广漠的操纵远景。20世纪80年月后，人们便将纳米SiO2包覆粒子均匀分手到含有多种细胞的聚乙烯吡咯烷酮胶体溶液中，使所须要的细胞很快分手出来。今朝，生物芯片资料已胜利操纵于单细胞分手、基因渐变阐发、基因扩增与免疫阐发（如在癌症等临床诊断中作为细胞外部旌旗灯号的传感器［5］）。伦敦的儿科病院、挪威工科大学和美国喷气鞭策研讨所操纵纳米磁性粒子胜利地停止了人体骨骼液中癌细胞的分手来医治病患者［6］。美国迷信家正在研讨用这类手艺在肿瘤初期的血液中查抄癌细胞，实现癌症的初期诊断和医治。
2.2用纳米资料停止细胞外部染色
比利时的DeMey博士等人操纵乙醚的黄磷饱和溶液、抗坏血酸或柠檬酸钠把金从氯化金酸（HAuCl4）水溶液中复原出来构成金纳米粒子，（粒径的尺寸规模是3nm～40nm），将金纳米粒子与事后精制的抗体或单克隆抗体夹杂，操纵差别抗体对细胞和骨骼内构造的敏感程度和亲和力的差别，挑选抗体种类，制成多种金纳米粒子—抗体复合物。借助复合粒子别离与细胞内各类器官和骨骼体系连系而构成的复合物，在白光或单色光照射下显现某种特色色彩（如10nm的金粒子在光学显微镜下呈白色），从而给各类构造“贴上”了差别色彩的标签，为进步细胞内构造分辩率供给了各类急需的染色手艺。
2.3纳米资料在医药方面的操纵
2.3.1纳米粒子用作药物载体
浅显来讲，血液中红血球的巨细为6000nm～9000nm，浅显细菌的长度为2000nm～3000nm［7］，激起人体病发的病毒尺寸为80nm～100nm，而纳米包覆体尺寸约30nm［8］，细胞尺寸更大，是以可操纵纳米微粒制成出格药物载体或新型抗体停止局部的定向医治等。专利和文献资料的统计阐发标明，作为药物载体的资料首要有金属纳米颗粒、无机非金属纳米颗粒、生物降解性高份子纳米颗粒和生物活性纳米颗粒。
磁性纳米颗粒作为药物载体，在外磁场的指点下调集于病患部位，停止定位病变医治，利于进步药效，削减副感化。如接纳金纳米颗粒制成金溶液，接上抗原或抗体，便能够或许够或许停止免疫学的间接凝集测验测验，用于疾速诊断［9］。生物降解性高份子纳米资料作为药物载体还能够或许或许或许植入到人体的某些特定构造部位，如子宫、阴道、口（颊、舌、齿）、凹凸呼吸道（鼻、肺）、和眼、耳等［10］。这类给药体例防止了药物间接被消化体系和肝脏分解而代谢掉，并防止药物对满身的感化。如美国麻省理工学院的迷信家已研制成以用生物降解性聚乳酸（PLA）制的微芯片为底子，能永劫候配选切确剂量药物的药物投送体系，并已被核准用于人体。最近几年来生物可降解性高份子纳米粒子（NPs）在基因医治中的DNA载体和半衰期较短的大份子药物如卵白质、多肽、基因等活性物资的口服开释载体方面具备广漠的操纵远景。药物纳米载体手艺将给恶性肿瘤、糖尿病和老年聪慧症的医治带来变更。
2.3.2纳米抗菌药及创伤敷料
Ag+能够或许或许使细胞膜上卵白落空活性从而杀死细菌，增添纳米银粒子制成的医用敷料对诸如黄色葡萄球菌、大肠杆菌、绿浓杆菌等临床罕见的40余种内科传染细菌有较好按捺感化。
2.3.3智能—靶向药物
在超临界高压下细胞会“变软”，而纳米生化资料细小易渗入，使医药家能转变细胞基因，是以纳米生化资料最有远景的操纵是基因药物的开辟。德国柏林医疗中间将铁氧体纳米粒子用葡萄糖份子包裹，在水中消融后注入肿瘤部位，使癌细胞部位完整被磁场封锁，通电加热时温度到达47℃，渐渐杀死癌细胞。这类体例已在老鼠身上停止的测验测验中获得了开端胜利［11］。美国密歇根大学正在研制一种仅20nm的微型智能炸弹，能够或许或许或许经由进程辨认癌细胞化学特色进犯癌细胞，乃至可钻入单个细胞内将它炸毁。
2.4纳米资料用于到场性诊疗
日本迷信家操纵纳米资料，开辟出一种可测人或动物体内物资的老手艺。科研职员操纵的是一种纳米级微粒子，它能够或许或许或许同人或动物体内的物资反应产生光，研讨职员用深切血管的光导纤维来检测反应所产生的光，经光谱阐发便能够或许够或许够体会是何种物资及其特色和状态，开端测验测验已胜利地检测出放进溶液中的神经转达物资乙酰胆碱。操纵这一手艺能够或许或许或许辨别身材内物资的特色，能够或许或许或许用来检测神经通报旌旗灯号物资和丈量人体内的血糖值及表现身材委靡程度的乳酸值，并有助于糖尿病的诊断和医治。
2.5纳米资料在人体构造方面的操纵
纳米资料在生物医学范畴的操纵相称普遍，除上面所述内容外另有如基因医治、细胞移植、天然皮肤和血管和实现野生移植动物器官的能够或许或许或许。
今朝，初次提出纳米医学的迷信家之一詹姆斯贝克和他的共事已研制出一种树形份子的多聚物作为DNA导入细胞的有用载体，在大鼠测验测验中已获得开端功效，为基因医治供给了一种更微观的新思绪。
纳米生物学的假想，是在纳米规范上操纵生物学道理，发明新景象，研制可编程的份子机械人，也称纳米机械人。纳米机械人是纳米生物学中最具备引诱力的内容，第一代纳米机械人是生物体系和机械体系的无机连系体，这类纳米机械人可注入人体血管内，停止安康查抄和疾病医治（疏浚脑血管中的血栓，断根心脏脂肪堆积物，吞噬病菌，杀死癌细胞，监督体内的病变等）［12］；还能够或许或许或许用来停止人体器官的修复任务，比方作整容手术、从基因中撤除无害的DNA，或把浅显的DNA装配在基因中，使机体浅显运转或使激起癌症的DNA渐变产生逆转从而耽误人的寿命。将由硅晶片制成的存储器（ROM）微型装备植入大脑中，与神经通路相连，可用以医治帕金森氏症或其余神经性疾病。第二代纳米机械人是间接从原子或份子拆卸成具备特定功效的纳米规范的份子装配，能够或许或许或许用其吞噬病毒，杀死癌细胞。第三代纳米机械人将包罗有纳米计较机，是一种能够或许或许或许停止人机对话的装配。这类纳米机械人一旦问世将完整转变人类的休息和糊口体例。
瑞典正在用多层聚合物和黄金制成医用微型机械人，今朝测验测验已进入能让机械人捡起和挪动肉眼看不见的玻璃珠的阶段［13］。
纳米资料所展现出的优良机能预示着它在生物医学工程范畴，出格在构造工程支架、野生器官资料、到场性诊疗东西、节制开释药物载体、血液净化、生物大份子分手等浩繁方面具备普遍的和诱人的操纵远景。跟着纳米手艺在医学范畴中的操纵，临床医疗将变得节拍更快，效力更高，诊断查抄更精确，医治更有用。
参考文献
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高考命题有广义和广义之分，广义的高考命题包罗测验内容规范表和试题计划表的制定，试题的编写及全卷试题订正和组配；1]广义的指试题的编写，包罗资料的挑选、标题标题题目标假想与命题的抒发三个关头。本文会商广义上的命题。试题计划表是命题专家按照测验内容规范表的须要事前制定的命题规范文件，命题教员应按照试题规范表展开详细的试题体例任务，时代应颠末资料挑选、标题标题标题标题标题题目假想、命题抒发等阶段。此中，资料拔取既是命题的动身点，也是命题的关头，将间接影响和决议后续任务的展开；标题标题标题标题标题题目假想是命题的焦点，迷信思惟是生物学标题标题标题标题标题题目假想的主线；命题抒发是命题手艺的表现和命题品德的深切。三者干系相反相成、缺一不可，均已成为以后体例高测验题的挑衅和亟须规范的标题标题标题标题标题题目。
标题标题标题标题标题题目一：资料拔取的挑衅。跟着高考命题权的下放，高考生物学科命题任务的迷信化和规范化遭到极大的正视，出格是试题本身的迷信性被以为是评判合格试题的首要目标之一。迷信性为生物学科命题素材的拔取提出了严酷的请求，即题干背景的来历和抒发必须是实在、靠得住、无歧义的。别的，高考生物学科命题应凸起才能立意，公允性、迷信性成为资料拔取的坚苦。
标题标题标题标题标题题目二：标题标题标题标题标题题目假想的挑衅。标题标题标题标题标题题目假想的动身点旨在查核考生已有的常识和才能，新课程高考更正视才能立意。生物学科才能是先生到场生物学科勾当（常识进修、测验测验操纵、糊口现实等）进程中渐渐构成和成长起来的比拟安定却不轻易或不能被间接察看的一种心思特质。高考要查核和丈量此类“埋没”目标，必须设置必然的情境安慰考出产生认知，经由进程考生的外显行动判定其思惟或才能程度。标题标题标题标题标题题目假想还包罗难度假想、辨别度假想、参考谜底假想等。较着，标题标题题目标假想是不是得当，可否起到安慰考生招考思惟等标题标题标题标题标题题目，都是对命题者的极大磨练。
标题标题标题标题标题题目三：命题抒发的挑衅。审阅近几年天下高考生物试题，命题职员的试题体例手艺日益成熟，但也伴跟着诸多标题标题标题标题标题题目，或题干信息冗余，或表述迷糊不清，或抒发存在歧义。诸如斯类欠规范的命题抒发体例严峻影响了命题的品德。同时，后古代主义推重者对高考命题任务提出自在化、特色化及人文关切等请求，对命题抒发关头也是一大挑衅。
二、科技论文作为高考生物学科命题素材的感性思虑
(-)科技论文的成长批评与内在释析
科技论文发源于17世纪60年月的欧洲，其标记是英国皇家学会开办的天下第一本学术期刊《哲学汇刊》。该刊调集了牛顿、伽利略等迷信家的前沿性功效。18世纪至19世纪，跟着多种天然迷信类期刊的敏捷增添，科技论文的内容几近笼盖迷信的一切范畴。20世纪90年月，互联网的鼓起使科技期刊的收集化检索变得很是壮大，我国也构成了以中国期刊网、万方期刊网等为代表的期刊集群。2003年教导部成立的“中国科技论文在线”，为鞭策科技交换、科技操纵与科技再创造供给了加倍便利的交换平台。
观点上，“科技”即迷信手艺，首要指天然迷信方面的手艺，“论文”即论证性的文章，是描写科研功效的书面文件。科技论文属于学术论文，是以具备学术论文的根基特色。中国国度规范GB7713—87大白指出：“学术论文是某一学术课题在测验测验性、现实性或察看性上具备新的迷信研讨功效或立异看法和常识的迷信记实；或是某种已知道理操纵于现实中获得新停顿的迷信总结，用以供给学术集会上宣读、交换或会商；或在学术刊物上颁发；或做其余用处的书面文件。美国生物学编辑协会以为，科技论文必须“易于人们的感官接管、实质上耐久、不加限制地为迷信界所操纵，并能为一种或多种公认的二级谍报源所选用”。
因而可知，实质上，科技论文以学术现实为按照，以新思惟或新停顿为焦点，以测验测验数据为例证，以口说话为载体。在内容上必须具备迷信性、立同性、权势巨子性，在表述上必须具备精确性、严厉性和逻辑性。作为报道、交换、存储科研功效的首要载体，科技论文是科技成长的总结，社会成长的各行各业都在操纵科技论文所抒发的科技功效。
(二）选用科技论文的须要性和可行性阐发
持久以来，高考命题或挑选中学课本、中学教辅、大学课本及课外资料（报纸、参考书等）作为命题背景资料，或挑选已有标题标题标题标题标题题目停止改编，也有少局部试题是命题专家按照已有常识和经历间接假想。这类传统选材体例在命题现实中存在良多忽略，易在迷信性、公允性、时效性，乃至宁静失密性方面产生标题标题标题标题标题题目。以科技论文为试题背景的命题体例与传统选材有实质区分，不只能进步试题各项属性程度，还能进步命题品德和命题效力。现将传统选材与科技论文选材体例停止比拟（表1)。
从表1能够或许或许或许看出，科技论文选材具备良多上风，选用科技论文停止高考生物学科命题具备现实的须要性和可行性。
1.须要性阐发
其一，保障了试题的迷信性、权势巨子性和时效性。迷信性是评估高测验题的一项首要目标，其首要性显而易见，这是中学教辅、课外资料、旧题改编等体例没法比拟的。试题中援用的任何数据乃至成题后的笔墨表述，取自具备国度法定权势巨子或专业权势巨子的公然出书物[6]，命题者经常内心很“安然”。在此底子上，命题专家凭仗本身专业手艺对论文作出精确的评估，能够或许或许或许在很大程度上有用防止高测验题发布后能够或许或许或许产生的各类负面影响。生物科技高速成长，试题该当在必然程度上表现古代生物科技的成长。操纵生物学科技论文命制高测验题从底子上保障了试题内容的时效性，表现迷信现实与教导讲授的同一。
其二，表现了高考的公允性。若选材来自中学课本、中学教辅或是旧题改编，做过近似标题标题题目标考生天然受害，一方面产生不公允，别的一方面进一步激起考生和教员的“题海战术”熟悉，倒霉于实质教导的成长。高校课本本来是_个杰出的命题素材来历，只是因为颠末量年的命题现实操纵，出格是自分省自立命题以来，每一年都要有十几套高考卷功效显现命题者辛辛劳薄命制出来的考题，一经检索才发明，早就有近似的考题了。而科技论文选材却能够或许或许或许有用防止此类情况产生，性命迷信每一年颁发的科技论文数目庞大，海量的选材要能“撞上”是很坚苦的。如许不只表现了选材公允，也能有用防止“撞题”。别的，高考命题前的资料筹办是高考涉密内容，经常慎之又慎，若能将“海量”的科技论文替换无限的资料，岂不处置了宁静失密标题标题标题标题标题题目？现实证实，这—做法在某些经由进程姑且抽调命题专家入围命题组的省分，是有用的，也是须要的宁静体例。
其三，表现才能立意。高测验题夸大才能查核。才能是人顺遂地实现某种勾当所必须具备的那些心思特色，只需在处置现实标题标题标题标题标题题目中才能查核其才能程度。[7]操纵科技论文作为背景资料更轻易实现查核目标才能化，因为，大批生物学科技论文的特质便是处置现实出产糊口中的现实标题标题标题标题标题题目，出格是带有生物测验测验论证类的论文，不只具备迷信的、最新的测验测验手艺和体例，另有翔实的测验测验数据。而以中学课本等作为背景资料只会侧重查核常识目标，倒霉于才能立意。
其四，进步命题效力和命题品德。论文凡是是以进程性体例显现生物学测验测验研讨功效，具备标题标题题目标提出、测验测验体例的假想、测验测验数据及测验测验功效的会商等，这与新课程夸大的切磋性进修是—致的。以科技论文作为命题动身点，命题者具备显现试题的迷信思绪和体例，同时免除一些对迷信性疑难的论证，进步了命题效力。试题以图表、笔墨、数据等多样化的情势显现，不只表现了试题所包罗的迷信素养，也使卷面加倍活跃、雅观，进步试题的命题品德。
2.可行性阐发
起首，延续、大批更新的生物科技论文和各类引文数据库为科技论文的挑选供给了无力的保障。高中生物学查核内容触及生物学_级学科下的12个二级学科，同时可扩大到农、林、牧、医、渔等各特色命迷信范畴。体比方斯普遍的性命迷信高测验题，仅取自传统素材显得远远不够。丰硕的论文来历和便利的检索体系能够或许或许或许完整转变命题者“黔驴技穷”的逆境。
其次，《浅显高档黉舍招生天下同一测验纲领（文科课程规范测验测验版）》（简称“测验纲领”大白指出，“要正视现实接洽现实，存眷迷信手艺、社会经济和生态情况的调和成长”。™这为“选用科技论文作为试题素材”这项新行动供给了鼎新的迷信按照。基于新课程高考鼎新的大背景，选用科技论文不只表现了生物迷信素养，也表现了迷信、手艺、社会的同一。
再次，大规模教导测验现实决议了将科技论文改编为局测验题是可行的。局测验题的实质是按照提拔人材的目标，按照必然的请求，经由进程考生解答标题标题标题标题标题题目或处置现实标题标题题目标进程和功效，猜测考生具备某一心思特色（常识、才能）的程度。基于迷信性的保障，对科技论文素材停止基于测验丈量请求的得当改编是可行的，也是须要的，丰硕、矫捷的命题手艺和命题手腕是其首要的保障。
三、基于科技论文背景的高考生物命题现实
基于以上会商，高考生物命题亟待构建一套基于科技论文背景的命题情势。2009年以来，本课题组展开了相干研讨，并停止了四次高考命题现实，开端总结了一套基于科技论文背景的高考生物科命题处置计划。上面别离从三个维度会商以科技论文为命题动身点的测验测验。
(一)资料拔取的维度
1.背景资料的挑选
现实阐发：挑选科技论文作为试题背景，在—定程度上保障了试题背景资料的迷信性、权势巨子性。斟酌到科技论文在试题命制中的出格用处，挑选的科技论文应停止以下三个方面的有用性判定：（1)挑选近期颁发的较高程度的科技论文，以保障资料的迷信性和时效性；（2)所选论文应触及社会、出产、糊口的研讨，以查核考生操纵生物学常识处置现实标题标题题目标才能；（3)所选论文主题辞应与测验纲领“生物常识内容表”中的“II”®请求分歧，以凸起查核考生对生物学焦点常识体系的把握，表现生物迷信素养。
操纵体例一：挑选近期颁发的较高程度的科技论文。浅显来讲，应检索来自中国迷信引文数据库（ChineseScienceCitationDatabase，简称CSCD)的论文。CSCD内容丰硕、计划迷信、数据精确。收录有生物学、农林迷信、医药卫生、情况迷信等范畴出书的上百种中英文科技焦点期刊和优良期刊。以2010年天下高考福建生物卷第26题第I小题（简称“2010福建高考26—I题”）为例，试题背景选自“几种情况因子对高生物量赤潮甲藻——东海原甲藻光合感化的影响”（《陆地迷信》2009年第12期）一文，是对我国东海陆地净化中赤潮产生机理的研讨，该题以“东海原甲藻激起我国东海赤潮”为情境，查核被试在实在背景中的常识迁徙才能，触及社会范畴和学术范畴的热点话题，所选背景资料角度新奇。
操纵体例二：挑选与生物学相干的社会、出产、糊口范畴的热点话题。比方，2011年天下高考福建生物卷第26题第I小题（简称“2011福建高考26—I题”）选自两篇文章：《rhIL-18对核辐射引诱小鼠脾细胞凋亡的按捺机制研讨》(《沈阳队伍医药》2009年第1期）；《rhIL-18对核辐射引诱小鼠脾细胞凋亡的按捺感化》（《剖解迷信停顿》2008年第2期）。尽人皆知，2011年3月，日本大地动激起了核辐射危急，姑且之间，核辐射在众人眼前激起极大发急，迷信地熟悉核辐射具备首要的社会意思。该题避开人类灾害的鼓吹，着眼于迷信阐发和迷信操纵核辐射，将核辐射与高中生物学触及的免疫、细胞凋亡、诱变育种和测验测验切磋假想无机地连系在一路，让人们大白核辐射固然恐怖，但能够或许或许或许防治，也能够或许或许或许操纵于农业出产，如许的考题具备丈量提拔功效和社会功效的同一。
操纵体例三：连系测验纲领（测验申明）“生物常识内容表”中的II层次请求。测验纲领对查核内容界定了层次请求。现实操纵中应以II层次请求为关头词停止文献检索。浅显来讲，不用I层次关头词，但不代表I层次内容不作查核，而是在II层次骨干常识和才能查核中经常能够或许或许或许衍生出对I层次的查核，表现试题对生物学焦点常识的查核。如细胞代谢中“影响光合感化速率的情况身分”关头词为“光合感化速率”和“情况”，由此检索到《几种情况因子对高生物量赤潮甲藻——东海原甲藻光合感化的影响》一文，体例试题时，能够或许或许或许衍生查核I层次的考点：赤潮的底子缘由 海水富养分解。
2.试题情境的设置
现实阐发：生物科技论文的撰写框架包罗测验测验资料和体例、数据处置、功效阐发、会商和总结等。因为迷信研讨是一项道理庞杂、步骤烦琐、手艺含量高的任务，论文表述的测验测验道理和步骤等能够或许或许或许触及良多生物学科的专业性或前沿性内容，如旌旗灯号通路、重组人白细胞介素、基因敲除等；显现的数据大多颠末SAS、SPSS等统计软件处置，如显现的图表经常触及^(较着性差别）、相信区间、姑(极较着）等统计学辞汇或标记。咱们将这些或是超纲或是不用在查核中显现的内容称为冗余信息，冗余信息会搅扰考生浅显答题思惟，影响试题的信度和效度，乃至构成严峻的体系丈量偏差。
操纵体例一：简化庞杂测验测验前提、体例的表述，以浅显易懂的笔墨高度归结综合庞杂的测验测验道理
和步骤,表现测验测验前提的繁复性。[9]比方,2011福建高考26—I题以“拔取多少测验测验小鼠，随机分红4组”替换原文中“测验测验动物C57纯系雄性小鼠，18〜20g，购自中国医科大学动物室’’、“动物模子及分组，按体重随机分为4组，每组8只”等庞杂的测验测验步骤，使考生对试题情境不感应目生，能尽力于焦点标题标题题目标解答，从而保障试题的公允性和可读性，进步试题的效度。
操纵体例二：剔除冗余信息，简化图表数据。生物学经常触及测验测验图表数据，简化图表数据或对图表停止出格处置变得很是须要。比方，2011福建高考26—I题，试题省略相信区间，以测验测验的样本均匀值又取代全体均匀值将测验测验检测处置体例省略，间接以“细胞凋亡绝对值”替换；剔除差别较着性阐发，默许测验测验数据均有差别较着性。以上处置，都是为了赞助考生疾速从题干中获得与丈量目标相干的信息，实现试题查核的目标。再如，2010福建高考26—I题，论文用散点图和回归线描写东海原甲藻光合感化随温度变更，因为高中不对散点图作测验请求，试题剔除散点图这一冗余信息，间接以回归线显现。固然，剔除和简化的操纵应以迷信性为前提，操纵的手腕经常便是用大观点笼统地描写小观点。比方，以“染色体变异”替换“染色体桥、微核、染色体断片”等超纲词语。
操纵体例三：可对试题必须显现的超纲内容做信息补充。比方，2009年天下高考山东生物卷第2题的题干是“细胞分解是豪侈基因挑选抒发的功效。以下属于豪侈基因的是（）”。“豪侈基因”是考生不曾打仗过的新名词，此处极易搅扰、利诱考生的思惟，增添考生在高考科场上的心思压力，构成考生答题思惟上的“眩晕”。若能在题干中供给“豪侈基因”的名词诠释，将转化妨碍考生答题的瓶颈，防止超纲怀疑，利于考生答题。
(二）标题标题标题标题标题题目假想的维度
1.认知程度和才能计划
现实阐发：凡是一道测验测验切磋题能够或许或许或许假想3〜5个小标题标题标题标题标题题目，查核考生对多个生物学现实的认知程度和多种生物学才能。斟酌到先生的认知成长是由笼统到详细、由浅入深、由初级到高档的按部就班的进程，标题标题标题标题标题题目假想的认知程度应由易到难、步步深切，查核才能丈量目标的层次也应渐渐进步，从而将绝对自力的小题经由进程一个完整的标题标题标题标题标题题目链串连起来，构成一道有序的完整标题标题标题标题标题题目。1D]
操纵体例一：将低层次的认知程度前置，高层次的认知程度后置，渐渐构成认知的梯度计划。布卢姆（BiS.Bloom，1956)等将先生在进修中的行动表现分为常识、体会、操纵、阐发、综合和评估六大类。[11]标题标题标题标题标题题目假想时应斟酌先生的认知蒙受度，操纵上可按照识记、懂得、操纵三个层次编排差别认知程度的标题标题标题标题标题题目。
操纵体例二：将低端才能前置、高端才能后置，渐渐构成才能梯度计划。可按照测验纲领对生物学科才能请求的编排挨次，起首查核懂得才能，其次查核测验测验与切磋才能或获得信息才能，最初查核综合操纵才能。如2011福建高考26—I题由四道自力的标题标题标题标题标题题目构成，四个小标题标题标题标题标题题目顺次查核考生懂得才能、获得信息的才能、测验测验切磋才能和综合操纵才能，构成才能的梯度计划。
2.基于才能立意的标题标题标题标题标题题目假想
现实阐发：新课程高考提倡以才能立意为主导，夸大常识、才能和实质一体化的命题思惟。才能表此刻处置现实标题标题标题标题标题题目中表现出来的心思品德，才能的焦点是思惟。是以，高测验题的标题标题标题标题标题题目假想应夸大在新情境中查核考生迷信思惟的品德，多查核考生在新情境中对常识的懂得、阐发、操纵等迁徙才能，少查核考生对常识的纯真影象。假想的标题标题标题标题标题题目要连系题干背景资料，牵扯的常识操纵要宽阔，解题思绪要来历于课本，又高于课本。
操纵体例一：操纵新情境，产生新标题标题标题标题标题题目。取材于科技论文的题干资料是考生还不打仗过的资料，可付与这些资料新意以引伸出新标题标题标题标题标题题目。比方，2011福建高考26—I题显现的测验测验数据只需三组，将原论文的第四组数据埋没，并假想成标题标题标题标题标题题目：“设置第四组测验测验的目标是（），请求考生经由进程对比阐发第三组测验测验数据，阐发假想第四组测验测验的企图。一方面查核考生测验测验与切磋的才能，别的一方面也查核考生获得信息的才能。
操纵体例二：环绕标题标题标题标题标题题目焦点，尽能够或许或许或许耽误拓展多个常识点。2011福建局考26—I题是一道典范的测验测验切磋题，以核辐射引诱细胞凋亡为切入点，融会查核免疫器官、免疫活性物资、细胞凋亡、诱变育种等多个跨模块、综合性常识。较着，试题不是纯真查核被试的影象情况，也查核被试在庞杂背景下的常识迁徙才能和处置现实标题标题题目标才能。
(三）命题抒发的维度
1.信息显现的节制
现实阐发：信息量过量过少都能够或许或许或许增添考生浏览承担，使局部考生思惟没法产生趋同反应，影响试题的难度、信度和效度，出格是对答题毫无赞助的冗余信息更是如斯。
操纵体例一：从字数上节制试题信息量。试题信息包罗题干信息和谜底信息，设置与谜底信息相称的题干信息量，有助于进步考生答题效力，同时进步试题与丈量目标的相干程度。浅显来讲，能够或许或许或许按照该题所占分值来肯定题干的字数和答题的字数。统计最近几年各地高考卷近似题型的字数，并将其作为信息量节制的参考是经常接纳的有用体例。
操纵体例二：接纳笔墨和图表相连系的体例显现信息。生物迷信经常以生物画图或图表体例显现迷信研讨体例或功效。试题应尽能够或许或许或许接纳图表与笔墨相连系的体例，一方面提倡文科迷信思惟和习气，别的一方面有用缩减浏览量，使考生读题加倍精确，试题的直观性和雅观性都获得较大的改进。比方，2011福建高考26—II题接纳表格的体例显现高中生物学测验测验经常操纵的染色体例，其字数要比纯笔墨抒发少良多，且更直观、精确。
2. 说话抒发的限制
现实阐发：说话恍惚在必然程度上能够或许或许或许构成考生思惟瓶颈，影响考生浅显思惟，倒霉于考生实在才能的表现。那些以增添试题难度为目标，接纳增添浏览量或刁钻怪僻、含糊其词的表述体例并不可取。别的，具备歧义的表述难以使考生到达趋同思惟，能够或许或许或许致使考生答题不周全、不精确，且使谜底多样化，加大阅卷难度。
操纵体例一：点窜含糊其词的表述体例，使试题清晰、大白。比方，2009年福建高考生物卷第27题第4小题：“以有氰、高茎与无氰、矮茎两个能不变遗传的牧草为亲本，经由进程杂交育种，能够或许或许或许没法获得既无氰也无产氰糖苷的高茎牧草。请以遗传图解扼要申明”，此中的“能够或许或许或许没法获得既无氰也无产氰糖苷的”，表述过于艰涩、含糊其词。浅显来讲，遗传育种经常是为了获得出产上须要的种类，但这里设问倒是“能够或许或许或许没法获得”，致使良多考生没法懂得题意，只好将各类情况的杂交组合都写出来。该小题抽样实测难度为0.16，与展望值相距甚远。
操纵体例二：对有歧义的表述应插手限制词。操纵科技论文为背景命题，在题干表述上经常会显现与中先生物讲授不分歧的提法，能够或许或许或许来自较新的生物学研讨体例，也能够或许或许或许来自生物学现实与中先生物讲授现实的摆脱，这时辰就须要对有歧义的表述插手须要的限制词。比方，2010福建高考26—I题增添了“净光合速率=真正光合速率一呼吸速率”的表述，因为高中生物学课本(人教版）中未说起“净光合速率”，从而防止产生歧义。
3.人文气味的渗入
现实阐发：后古代主义对高考命题任务提出了自在化、特色化、人文关切等请求。命题者应加强对考生的科场人文关切，力图试题的阐述和设问体例切近考生的思惟习气，保障考生一向具备轻松、鼓动勉励的招考心态。要尽力防止决心“挖圈套”式的命题体例，有用掩护考生浅显的科场招考思惟。
操纵体例一：切近考生思惟，防止高耸设问。比方，细心斟酌2011福建高考26—I题第
(1) 小题和（3)小题的表述，此中“已知IL一18是一种淋巴因子”与“与第③组比拟”看似过剩，现实是为了指点被试顺遂作答；审阅第
高中生物人教版?一中的“生物构造中的糖类、脂肪和卵白质的判定”测验测验属于定性测验测验，是高中生打仗的第一个生物测验测验。按照先生初中测验测验的底子，既能够或许或许或许操纵成考证性测验测验，又可假想为切磋性测验测验。经心筹办构造该测验测验，会较好地培育先生的根基测验测验手艺，激起进修生物的乐趣。
1 标题标题标题标题标题题目提出
本测验测验首要由检测复原糖、脂肪和卵白质3个小测验测验构成，在现实讲授中发明测验测验功效较差，达不到预期目标。常存在①手艺请求高。测验测验触及的生物手艺多，如徒手切片手艺、建造姑且装片、显微镜操纵、水浴加热等，出格是很难切出厚薄均匀的花生子叶薄片。②测验测验仪器多。先生操纵时步骤轻易夹杂，加错试剂。③测验测验容量大。讲授后留给先生操纵和切磋的时辰短，一节课很难实现全数测验测验。同时不能大家脱手停止测验测验。④宁静性低。玻璃仪器摆满了桌面，极易掉落。滚水加热、徒手切片时可对先生身材构成风险，降落先生测验测验的热忱。⑤资料处置烦琐。苹果匀浆，花生、大豆的浸泡和研磨，筹办任务量大。测验测验中资料华侈景象严峻。
2 测验测验改进
2.1 复原性糖的检测
（1）从梨块上切取边长约0.8cm的梨条，再将其切成多少小梨片，放入试管中。
（2）量取等量的斐林试剂甲液和乙液，夹杂配制成斐林试剂中国知网论文数据库。
（3）向装有梨片的试管内注入刚配制的斐林试剂，直至淹没梨片。悄悄震动几回。
（4）用酒精灯加热试管约2min，便能够或许够或许察看到溶液由蓝色→棕褐色→砖白色。
测验测验操纵简便，色彩变更较着。先生每人都能操纵教导学论文，一只梨可供全班先生操纵，节俭了资料。不停止滚水浴，增添了测验测验的宁静性。
2.2 脂肪的检测
取干净的试管，插手5mL摆布的净水，滴加一滴先生从家里所带的动物油，油滴飘浮于水面。再滴加一滴苏丹Ⅳ，顿时便可清晰地看到被染成白色的油滴。
定性测验测验中只需有特异的色彩反应，便能够或许够或许肯定某种物资是不是存在。操纵先生的自备资料，加强了压服力，费事节时，测验测验功效佳。脂肪的判定常支配在最初做，如时辰丰裕可构造先生操练徒手切片，用显微镜来察看花生子叶细胞中的脂肪颗粒。
2.3 卵白质的检测
课前将鸡蛋煮熟，剥掏出卵白，磨成小颗粒。（1）向试管内插手少许的鸡卵白颗粒。（2）插手双缩脲试剂A液1mL，震动半晌。（3）再滴加双缩脲试剂B液5滴，震动。（4）静置2min后，可察看到溶液变为紫色。
传统的讲堂评估正视于对教员本身才能的评估,如教员的构造讲授、教态、说话抒发,常识的迷信性、重难点的冲破,各讲授关头的时辰分派和讲授板书假想等方面的评估。简略地说,便是对教员在讲堂讲授中“自编、自导、自演”才能的评估。而作为进修的主体——先生,在讲堂讲授中的表现、感化、地位则被轻忽。一节课竣事,先生事实学到了甚么,在讲堂中表现若何,是不是自动、自动到场讲授进程,则不激起评课者的正视。评课者盯着的只是教员,学天生为讲堂讲授中的副角,成为教员上课的一种陪衬。
新课改教导理念的转变,对讲堂讲授评估产生了底子性的转变。新课程鼎新的讲堂评估是请求教员把着眼点放在发明和成长先生多方面的潜能上,赞助先生进步自我效力感,周全增进先生的成长。
2、论文的计划层次。按照论文内容的差别,有的论文中间论点包罗几个分论点,每一个分论点属同一级标题,称为一级标题。一级标题下的小标题称为二级标题,以此类推。论文的一级标题不宜跨越7个,浅显来讲以3~5个为好。论文标题层次的别离,浅显不宜跨越4级。标题层次的表现体例有以下2种体例:
第1级标题——1 第1级标题—— 一
第2级标题——1.1第2级标题——(二)
第3级标题——1.1.1 第3级标题——1
第4级标题——1.1.1.1 第4级标题——(1)
现以《察看动物细胞计划的一种抱负替换资料——火葱》(教导与摸索,2009.12期)一文的计划层次申明以下:
1 火葱的分类地位及生物学特色-------一级标题
2 火葱作为察看动物细胞计划测验测验资料的长处----一级标题
2.1 测验测验功效好---------------------------二级标题
2.1.1 物像清晰-----------------------------三级标题
2.1.2 染色功效好--------------------------三级标题
2.1.3 细胞膜、细胞壁轻易辨认--------三级标题
2.1.4 细胞核显目。------------------------三级标题
2.1.5 细胞质、液泡清晰可见-------------三级标题
2.2 操纵便利--------------------------------二级标题
2.2.1 个别巨细得当--------------------三级标题
2.2.2 下表皮易剥离--------------------三级标题
2.2.3 易染色------------------------------三级标题
2.2.4 制片轻易-----------------------------三级标题
2.3 资料获得轻易--------------------------二级标题
2.4 经济实惠-------------------------------二级标题
3 火葱与洋葱测验测验功效的对比----------- 一级标题
3.1 不异点----------------------------------二级标题
3.2 差别点----------------------------------二级标题
3.2.1 染色功效---------------------------三级标题
3.2.2 细胞膜-----------------------------三级标题
3.2.3 细胞质-------------------------------三级标题
3.2.4 液泡----------------------------------三级标题
3.2.5 细胞核-------------------------------三级标题
3、结语。结语是对论文内容的归结和总结,起到前呼后拥、一语道破的感化。如《生物学课程资本的开辟操纵》一文的结语:总之,生物学课程资本的种类很是丰硕,有着广漠的开辟操纵远景,生物学教员对生物学课程资本的公道开辟操纵,能够或许或许或许进步先生对生物学科的进修乐趣、进修热忱,能够或许或许或许增进先生多方面潜能的成长,有用增进生物学讲堂讲授。
?字体、字号、字数请求。
论文的标题浅显用宋体,正文用宋体、仿宋、楷体等字体。标题的字号按照字数肯定,浅显用一号或小一号、二号;作者姓名、任务单位、邮编用小四号;择要、关头词用五号;一级标题用四号字、加粗;二级标题、三级标题、四级标题、正文用小四号;参考文献用五号。差别的刊物对论文的字数请求差别,论文的字数浅显请求在1500~4 000字。1500~3000字的短小精干的论文最受接待,论笔墨数请求不很是严酷。
? 参考文献请求:
文中的参考文献,遵照援用的前后挨次用阿拉伯数字加方括号在援用处的右上角标出,并在文末按照援用的前后挨次标注出援用参考文献的作者姓名、援用文标题、文献中的页码、出书单位、出书日期。同一参考文献若是屡次援用,用同一序号标出。参考文献择其最首要者援用,未公然颁发的资料不能援用。综述性的论文参考文献为5~8条,浅显专论性文章的参考文献为3条之内。如:《对八年级生物课本中“等位基因”观点的切磋》一文的参考文献:
1 冯德培、谈家岐、王鸣歧,《扼要生物学词典》,上海词典出书社,1982,P1463
2 盛祖嘉,《中国大
百科全书·生物学遗传学》中国大百科全书出书社,北京,上海,1983,P49 3 第2届《遗传大名词》核定委员会,《遗传大名词》迷信出书社,2006,P9
4 《新世纪版义务教导课程规范测验测验教科书·生物学》(教员讲授用书),P86、90
别的请求。
1 计量单位。抒发量值时,在公式、图表和笔墨阐述中,操纵国度划定的计量单位,比方:kg、km、kpa、ml、m、s、t、min、h、d等,标点标记、数字用法等按国度规范。
半枝莲、95%乙醇、盐酸小檗碱对比品、蒸馏水、盐酸溶液、氢氧化钠溶液、碘-碘化钾试剂
仪器：
722型紫外分光光度计、电子阐发天平、电热恒温水浴锅、数据超声波洗濯器、微型动物粉碎机、PH计、加热板、轮回水式多用真空泵
测验测验体例：
超生波提取法、半仿生法、正交测验测验、生物碱的判定体例
测验测验步骤：
一、药品、仪器的筹办
二、对比品溶液的制备、波长的测定、规范曲线的建造、推算出回归方程
三、样液的制备
四、用半仿生法提取半枝莲中生物碱
1、单身分测验测验
(1)温度对提取功效的影响
(2)酸度对提取功效的影响
(3)碱度对提取功效的影响
(4)料液比对提取功效的影响
2、身分、程度的肯定及停止正交测验测验假想：
由单身分温度、酸度、碱度和料液比作为正交测验测验的四个程度
停止正交测验测验以肯定半仿生法中最优的提取前提
五、超声波赞助半仿生法提取半枝莲生物碱：在上述半仿生法获得的最优提取前提下停止超声波提取
1、单身分测验测验
(1)温度对提取功效的影响
(2)提取次数对提取功效的影响
(3)酒精浓度对提取功效的影响
2、身分、程度的肯定及停止正交测验测验假想：
由单身分温度、提取次数、酒精浓度作为正交测验测验的三个程度停止正交测验测验以肯定在超声波赞助半仿生法提取中的最优前提
六、在超声波赞助半仿生法提取的最优前提下提取半枝莲中生物碱
七、操纵紫外分光光度计测定上述提取到的生物碱的吸光度，与规范曲线停止比拟，计较诞生物碱的量及产率。
八、生物碱的判定：
生物碱积淀反应
1、碘化铋钾试剂反应 取渗漉液1ml，加碘化铋钾试剂1滴～2滴，天生棕色至棕白色者为阳性反应在。
2、碘-碘化钾试剂反应 取渗漉液1ml，加碘-碘化钾试剂1滴～2滴，天生棕黄色积淀者为阳性反应。
3、硅钨酸试剂反应 取渗漉液1ml，加硅钨酸试剂数滴，天生淡黄色积淀者为阳性反应。
测验测验计划假想范文二一、【测验测验标题标题标题标题标题题目】：
印刷前提对预涂膜覆膜品德影响切磋
二、【测验测验假想思绪】：
影响覆膜品德身分首要分为两类，即覆膜工艺的影响和印刷前提的影响。覆膜工艺的影响无疑是覆膜的温度、速率、压力三种身分。经常此刻对覆膜品德影响身分大多是斟酌到覆膜工艺(温度、速率、压力)的影响身分如显现：打皱、起泡、卷曲、出膜、亏膜、搭边痕的品德身分。而很少斟酌印刷前提对覆膜品德的影响。而经常有些时辰便是因为印刷前提的身分才影响了覆膜的品德。基于如斯此次测验测验研讨的标的目标便是在划定必然的覆膜前提，经由进程转变样张印刷所需前提停止打样并将其做预涂膜处置。终究的测验测验功效是为了切磋印刷前提是若何影响预涂膜品德，是不是有必然的纪律可循。最初以此为按照肯定印刷品覆膜所适合的最好印刷前提。
三、【测验测验仪器及资料】：
(1)IGT印刷适性仪、预涂膜覆膜机、剥离强度仪;
(2)油墨、铜版纸(肯定规格，ph值)、BOPP预涂膜。
四、 【测验测验筹办】：
在IGT印刷适性仪停止测验测验打样，肯定浅显印刷打样的印刷前提规模。(温度、速率、压力大抵规模)。
五、 【测验测验道理及步骤】：
(1)接纳覆合强度目标考查覆膜品德, 覆合强度的丈量参考GB2T2790-1995规范停止丈量。对每一个试样, 从剥离力和剥离长度的干系曲线上测定均匀剥离力, 以N为单位, 记实下最少100mm剥离长度内的剥离力的最大值和最小值, 并计较响应的剥离强度值。
计较公式以下:
180 = F /B
式中: 180 为剥离强度(N/mm); F为剥离力(N); B为试样宽度(mm)。 操纵上式, 计较一切测验测验试样的均匀剥离强度、最小剥离强度和最大剥离强度, 和它们的算术均匀值
(2)操纵IGT印刷适性仪在铜版纸上面停止打样。
1、在必然的墨层厚度、印刷速率、印刷压力的情况下停止印刷实地打样，打样后将样条放在浅显的印刷情况中停止枯燥(枯燥时辰受纸张、温度、湿度的影响)。经由进程对差别印刷时辰间隔(0.5h、1h、1.5h、2h、2.5h、3h、3.5h、4h、4.5h、5h、5.5h、6h、6.5h、7h)的样条在预涂膜覆膜机上面停止覆膜( 覆膜的压力在6. 8mPa, 温度为90 e, 覆膜速率为100r/min)。而后在剥离强度测定仪上测试百般条的剥离强度记实数据，肯定最好覆膜时辰间隔。
2、在第一步所肯定的最好印刷时辰间隔的前提下，印刷压力、印刷速率必然，转变印刷墨层厚度停止印刷实地打样，对差别墨层厚度(0.5-4.0Lm)下的印刷样条停止同上覆膜处置，在剥离强度测定仪上测试百般条的剥离强度，记实数据。肯定覆膜的最好墨层厚度。
3、在前两步所获得的最好印刷时辰间隔和最好印刷墨层厚度的情况下，节制印刷压力必然，转变印刷速率(0.1、0.2、0.3、0.4、0.5、0.6、0.7、0.8、0.9、1.0m/s)停止印刷实地打样，对差别印刷速率下的印刷样条停止同上覆膜处置，在剥离强度测定仪上测试百般条的剥离强度，记实数据。肯定最好的印刷速率。
4、按照前三步的测验测验所得的最好印刷时辰间隔、最好印刷墨层厚度、最好印刷速率的情况下，转变印刷压力(200-800N)停止印刷实地打样，对差别印刷压力下的印刷样条停止同上覆膜，在剥离强度测定仪上测试百般条的剥离强度，记实数据。
六、【数据处置】：
七、【测验测验功效】：
八、【参考文献】：
齐晓堃, 印刷资料及适性北京 ：印刷财产出书社 20xx.1(浅显高档教导印刷工程本科计划课本)
许文才，包装印刷与印后加工 北京：中国轻财产出书社 20xx.8 (浅显高档教导十五国度计划课本)
冯瑞乾，印刷道理及工艺 北京：印刷财产出书社 1999-4 (高档黉舍印刷工程类课本)
GB- T2790- 1995,胶粘剂180b剥离强度测验测验体例挠性资料对刚性资料[S]
测验测验计划假想范文三一、实训目标
毕业论文假想是先生综合操纵所学常识阐发和处置现实标题标题题目标一个很是首要的调集现实关头。
经由进程这一关头的实行，指点先生把握论文写作体例，学会查询拜访研讨，实现毕业论文假想与写作，并在论文写作现实中获得熬炼，进步阐发和处置标题标题题目标才能，晋升立异熟悉和专业实质，成为一名善查询拜访、懂研讨、能说会写的合格的毕业生。
二、论文假想指点小组
组长：徐先海、鲁伦文
组员：唐娟、李向萍、温晓琼、邓君瑞、卜剑莉
三、论文假想(写作)请求
毕业论文是先生毕业前必须实现的一个首要讲授关头。请求先生能够或许或许或许操纵在校所学的根基常识、底子现实、手艺东西与体例等，研讨和切磋现实任务中的相干标题标题标题标题标题题目。它是综合考查先生操纵所学常识阐发标题标题标题标题标题题目、处置标题标题标题标题标题题目和操纵才能的首要手腕。在论文写作进程中请求先生做到：
1、 应在脚踏实地、深切现实的底子上，操纵所学常识，自力写出具备必然品德的毕业论文。
2、 毕业论文选题应在所学专业规模之内，其情势为学术论文、研讨报告或阐发报告。
3、 毕业论文应做到观点新奇、大白，有首创性;资料翔实、无力;计划完整、谨慎;说话精确、通畅流利。
4、 毕业论文按同一版式的规范化请求(参见系部同一格局)，正笔墨数请求10000-15000字。
四、论文假想实行关头
1、构造带动
时辰：20xx年4月27日
地址：二教(501)
工具：国贸08级全数同窗
体例：个人带动会
班主任(教导员)要辅佐做好构造带动任务。
2、先生报名分组
毕业论文为先生?关头，不得免修。11届毕业生要在5月1日前提交报名请求。按照报名情况对其停止分组。每位指点教员指点一组先生，准绳上每组不跨越18人。
3、指点教员聘用
毕业假想指点教员以对口专业，具备本迷信历，且现实才能较强，有必然讲授经历的专职教员来担负。指点教员担任先生毕业假想的全程指点任务。
指点教员的职责有：
(1)指点教员应当真实行职责，指点先生构造好毕业论文假想的全进程;
(2)指点教员对论文的选题标的目标、思惟观点、计划格局及笔墨品德负指点义务，并担任在论文定稿的指定地位按请求签订评阅定见;
评阅定见包罗的首要内容有：选题是不是得当，论文主题是不是大白;计划是不是公道，表述是不是精确、流利;选用资料是不是得当、充实，是不是具备代表性;阐述的逻辑性是不是公道等。
(3)指点教员应催促先生实时与教员接洽，按时提交写作纲领、底稿、点窜稿和正稿。
(4)指点教员须将指点定见记实在任务记载本上;
(5)指点教员对每先生的论文指点时辰不低于5学时/周。
4、先生假想(撰写)论文
先生在指点教员指点下肯定选题。选题请求：
(1)应合适专业培育目标和讲授请求，不应离开专业规模，要有必然的综合性，具备必然的深度和广度;
(2)标题标题标题标题标题题目巨细适中，对现实任务有必然的指点意思;
(3)应连系以后的热点和难点标题标题标题标题标题题目停止思虑，鼓动勉励处置现实标题标题标题标题标题题目;
(4)选题一经肯定，浅显不再作变更。
在论文假想(撰写)进程中，指点教员应赞助处置先生在假想(写作)进程中存在的详细标题标题标题标题标题题目。论文实现后，指点教员须写出合适全数论文假想进程情况的初评成就与考语。
5、时辰支配(共5周)
安排带动、肯定选题阶段：4月27-5月10日;
制定论文纲领阶段：5月10-24日;
假想(撰写)论文底稿阶段：5月25-6月24日;
点窜阶段：20XX年6月25日-20XX年6月
提交论文及论文成就初评、辩论阶段：20XX年6月尾-7月。
五、论文假想成就评定
毕业论文假想成就以百分制表现，由指点教员按照先生写作立场和论文品德给出。分优、良、合格、不合格四等。
1、优(90分以上)
(1)合适党和国度的有关目标、政策;
(2)论文选题大白，能够或许或许或许现实接洽现实，对经济任务或学术标题标题题目标研讨有必然的独到性与现实性，并有必然的新意;
(3)论文中间论点凸起，论据充沛，论证进程逻辑性强，文章计划公道，表述流利，层次清晰。
2、良(80-89分)
(1)合适党和国度的有关目标和政策，能够或许或许或许操纵所学常识，现实接洽现实，观点大白，阐发比拟深切;
(2)论文选题大白，具备必然的现实意思，能用所学常识阐发明实经济标题标题标题标题标题题目;
(3)论文中间凸起，论据较充沛，论证进程较有逻辑性，文章计划公道，层次清晰，表述通畅。
3、合格(60-79分)
(1)合适党和国度的有关目标和政策，根基上能够或许或许或许操纵所学常识去阐发标题标题标题标题标题题目，但内容欠充实;
(2)论文的论点较大白，尚能接洽现实经济任务;
(3)论文资料尚充沛、详细，但比拟陈腐，缺少新意，论证不够充实，缺少压服力。文章有必然的层次，笔墨尚通畅。
4、不合格(60分以下)
凡具备以下条目之一者均为不合格。
据统计，2008年我国苹果莳植面积为199.23万hm2，产量为2984.7万t，占天下苹果面积和产量的40%以上，居天下第一名[1]。因为良多主产区大局部耕地都栽植了苹果，很难在新区域成长果树莳植，苹果再植标题标题标题标题标题题目严峻搅扰着我国苹果主产区果业的可延续成长。以河北省为例农业论文，本研讨组在2007和2008年查询拜访发明，树龄在15年以上的苹果园已占到近70%，而苹果最好的功效春秋浅显不跨越20年，标明果园更新换代标题标题标题标题标题题目已很是紧急。苹果树再植病（Apple replant disease，ARD）又称轮作妨碍或忌地景象，有的也叫再植妨碍，抱病植株表现为树势弱、叶片小、新梢细短、根系腐臭、根量削减、果实品德差等病症。据报道，果树再植病首要是因为泥土残毒、线虫、泥土根际无害微生物等影响构成[2]。再植病害病因庞杂，但浩繁的研讨报道[3~5]以为，泥土微生物对果树再植病害的产生阐扬着首要感化[6]论文开题报告典范。
变性梯度凝胶电泳（denaturing gradient gel electrophoresis，DGGE）最早是一项用于DNA渐变检测的电泳手艺[7]，最近几年来已被普遍操纵于各类情况微生物的生态研讨中，如高热温泉、湖泊、陆地、泥土和根际等[ 8]。本文起首研讨了跟着苹果莳植年限的耽误，其根际泥土对后茬再植平顶海棠幼苗的株高、生物量、病发率和病原真菌数目标影响农业论文，而后接纳PCR-DGGE手艺，以差别树龄苹果园泥土样品中泥土微生物的基因组总DNA为研讨工具，经由进程比拟泥土华夏核微生物的16S rDNA和真核微生物的18S rDNA差别，研讨了跟着苹果树龄的增添泥土中微生物群落多样性的变更情况。
1 资料与体例
1.1 测验测验资料：花盆（10×12 cm）；海棠种类：平顶海棠(Malus robust Rehd.)
1.2 育苗：海棠种子用1%次氯酸钠外表消毒5分钟，而后在自来水下冲刷5分钟。4℃层积处置30 d以上，待种子露白后收获于灭菌的泥煤苔和珍珠岩夹杂基质上，按时灌溉Hoagland养分液。每6 d改换新的养分液，调理pH 6.0士0.2，培育温度（24士1)℃，12 h光照的培育室中成长。
1.3 土样收罗和处置设置：泥土收罗于河北省清苑县温仁村红富士苹果园，收罗果园的树龄别离为3、8、15和24年。砧木为八棱海棠（Malus micromalus Makino)，泥土典范为黄褐土。对比土收罗于苹果园四周未莳植过果树的麦田。果园土样收罗距苹果树干1.5 m，深10-30 cm规模内的根际泥土，五点随机取样农业论文，混匀、过筛，备用。对差别树龄果园泥土的肥力测定功效标明，泥土肥力与苹果树龄间不较着相干性（表1）。将差别树龄苹果园泥土及对比泥土分装于直径12 cm花盆中，每盆装土1 kg。将在培育室中培育4周的平顶海棠幼苗移栽于差别处置的花盆中。每一个处置4次反复，每6株幼苗作为一个反复论文开题报告典范。
1.4 泥土微生物总DNA提取和PCR扩增
1.4.1 泥土微生物总DNA提取和纯化
接纳化学裂解法，称取 5 g根际泥土样品，按照化学裂解法的测验测验步骤停止泥土微生物总DNA的提取[9]。为了防止泥土样品所含腐殖质杂质对PCR扩增反应的按捺感化，对泥土样品的基因组DNA粗提液停止了纯化。接纳Takara公司凝胶试剂盒对5种泥土样品的基因组DNA粗提液停止了纯化。
表1 差别处置的泥土肥力对比
Table 1 Soilfertility of different treatments
名目test items
对比 control
树龄 tree age (years)
3
8
15
24
速效氮available nitrogen (mg/kg)
71
58
56
69
52
速效磷available phosphorus (mg/kg)
52
60
51
65
62
速效钾available potassium (mg/kg)
85
78
92
88
55
无机质 organic matter (%)
1.3
1.3
2.6
2.0
1.5
盐分 salt (%)
0.07
0.05
0.08
0.02
0.05
pH值
6.40
5.20
为知足这些请求，在成长古代电子和电子计较机迷信与手艺的同时，人们对光学信息迷信与手艺也有极大的乐趣。这是因为，由光束、光波或光子作为信息的载体时，不只信息容量大、传布速率快，并且并行性高、互连才能强，存在着庞大的潜伏上风。在此次集会上，近三分之一的论文是对光学存储和神经收集的。大会主席、俄罗斯迷信院的A.IJ.Mik。!边n院士在大会报告“全息存储、近况与预期操纵”中综述了俄罗斯和国际上在这个范畴的研讨状态。
番木瓜环斑病毒（Papaya ringspot virus，PRSV）是影响番木瓜财产的最首要的一种病毒，由它致使的番木瓜环斑病毒病（Papaya ringspot disease，PRSD）是一种散布最广、风险最严峻的番木瓜病害，现已成为限制番木瓜出产的一种天下性的严峻病害。传统的一些抗病毒的战略经常见效甚微。跟着动物基因工程的成长，之外壳卵白基因介导的抗病性研讨为防治动物病毒病带来了新的路子（郭兴启等，2004，Tougou et al. 2006）。跟着迷信手艺的成长和对PRSV的深切研讨生物论文，以基因工程为首要研讨手腕的番木瓜抗病毒研讨显现出庞大的潜力。RNA搅扰（RNA interference，RNAi）是多种生物体内由双链RNA介导的同源mRNA降解景象。动物体天然的RNAi体系并不能起到完整或较高程度地抵当某种病毒侵染的感化。若是报酬地将某种病毒的某一序列假想成双链计划，导入动物体，使之抒发可引发RNAi的双链RNA，经由进程引诱的RNAi，强化动物体内天然的RNAi抗病毒机制，就有能够或许或许或许获得较高抗性的转基因动物。dsRNA介导的抗病性是迩来发明并获得普遍操纵的一种有用战略。因为dsRNA介导的抗病性具备一些无可比拟的长处(如单拷贝也能产生高抗的转基因植株；短片断的核酸序列也能够或许或许或许起到高效抗病性；入侵的病毒，其RNA会敏捷被降解，不须要转入的病毒基因抒发产生卵白质产品等)，使得这类抗病毒的战略具备广漠的操纵代价(Voinnet，2001)。（此段是按照编辑点窜定见而补充的内容）
Eamens et al.（2008）操纵大豆矮化病毒（Soybean dwarf virus SDV）CP[微软用户1]基因构建的hpRNA转化大豆胚状体，转基因T2代动物仍坚持病毒抗性论文参考文献格局。竺晓同等，（2006）操纵土豆 Y 病毒脉坏死株系外壳卵白（CP）基因的hpRNA抒发载体转化烟草，正向反复转基因植株不表现抗病，而反向反复（IR）计划的转基因植株表现高度抗性。是以，研讨CP基因发夹RNA的缄默功效，对番木瓜的抗病毒研讨有着首要的意思。
浩繁研讨标明：转CP基因动物的抗病性浅显能够或许或许或许获得不变遗传生物论文，并且具备较小的潜伏风险性，被以为是最有操纵潜力的路子之一。首要缘由以下：第一，外壳卵白基因在转基因动物中能够或许或许或许获得不变遗传；第二，对具备特同性抵当病毒的才能，对亲缘干系较远的病毒不具备抗性；第三，抗病才能与转基因动物体内的卵白产品的抒发量成反比。
固然CP基因介导的抗病性已获得了很大的胜利，可是仍存在一些标题标题标题标题标题题目：一是CP基因介导的抗病性首要表此刻病毒侵染的初期，表此刻只是提早病发，当存在高接种量或反复接种时则会粉碎其抗性；二是操纵CP基因介导的抗病性具备潜伏的风险性，因为外壳卵白对别的病毒的包壳感化能够或许或许或许会致使非蚜传病毒变为蚜传病毒（Hammond et al，1980）。是以，研讨职员担忧导入的基因能够或许或许或许与动物基因重组致使产生新的病毒。
（此段是按照编辑点窜定见而补充的内容）
今朝，已胜利操纵的病毒来历的基因介导的抗性首要包罗外壳卵白基因（Zrachya et al. 2007）、复制酶基因（Sanford et al，1985；Palukaitiset al，1984）、挪动卵白基因和病毒核酸等（庞俊兰，2002）。同时因为在动物中引发RNAi缄默进程能有用抵当病毒的入侵，是以构建病毒基因的反向反复计划并将其导入到受体资料中生物论文，能够或许或许或许获得高抗该病毒的植株（Waterhouse et al，2002）。
本研讨将测验测验室已构建好的含有CP基因的反向反复抒发载体停止了情势动物烟草和拟南芥的遗传转化，并操纵渗入法成立了番木瓜的农杆菌刹时抒发体系。同时对转化植株停止攻毒测验测验，监测转基因动物的抗病性和抗病机制。比拟PRSV病毒在其寄自动物和非寄自动物上RNAi效应的差别。经由进程强化动物体的RNAi抗病效应，为培育抗PRSV的番木瓜种类供给现实按照。
1资料与体例
1.1资料和试剂
拟南芥（Arabidopsis thaliana）：哥伦比亚0号由华中农业大学胡春根传授供给；烟草（Nicotiana tabacum）：k236由华中农业大学陈守文传授供给；番木瓜‘夏威夷’（CaricapapayaL.）：；大肠杆菌（Escherichia coli）菌株：DH5α；根癌农杆菌（Agrobacteriumtumefaciens）菌株：GV3101；质粒：pHellsgate12-CPIR(简称pHG12-CPIR) （计划如图1）均由国度果树脱毒种质资本室内保管中间脱毒研讨室供给。转化pHG12-CPIR的烟草植株由本研讨室硕士生王莉转化，作者进一步经由进程构造培育继代培育而成（此句补充后，更精确地诠释资料的来历）。传染番木瓜环斑病毒的番木瓜病叶样品由广东省农业迷信院果树研讨所供给。
'夷cifulltobacoo and PCR试剂盒购自北京全式金生物手艺无限公司，动物RNA提取TrizolReagent购自Invitrogn公司，RT-PCR试剂盒购自北京Bio Dev生物手艺无限公司，其余经常操纵试剂为国产阐发纯。番木番CP基因P5、P4和T2引物序列按照文献（姜玲等，2008）中测定的序列分解。NPTⅡ基因的引物按照pBI121载体序列分解。ACTIN Nt、ACTINPa和ACTINAt基因的引物按照文献（代晓燕等，2008）分解（表1）。引物分解由上海生工生物工程手艺办事无限公司实现论文参考文献格局。
图1．pHellsgate12-CPIR干与抒发载体示企图
Fig.1．Sketch map of pHellsgate12-CPIRinterference expression vector
表1 操纵在本项研讨中的PCR引物及序列
Table 1 PCR primers and their sequences usedin this study
基因Gene
引物代号
Primer code
序列 Sequence
(5′to 3′)
CP
P5（+）
atgtccaagaatgaagct
P4（-）
ttagttgcgcatacccaggag
T2（+）
ctcgctagatatgctttcgatttc
NPTⅡ
nptⅡ（+）
ctctgatgccgccgtgttcc
nptⅡ（-）
gcccaatagcagccagtccc
ACTINNt
actinNt（+）
ggtagctccacctgagaggaagt
actinNt（-）
gcctttgcaatccacatctgt
ACTIN Pa
actinPa（+）
ttgattttgagcaggagcttga
actinPa（-）
tgagtgatggctggaagagaac
ACTINAt
actinAt（+）
菠萝(Ananas comosus)，凤梨科，凤梨属多年生木本果树动物[1]，原产巴西，为寒带多年生木本动物，16世纪时传入中国生物论文， 有70多个种类，岭南四大名果之一。菠萝含有大批的果糖，葡萄糖，维生素A、B、C，磷，柠檬酸和卵白酶等养分物资。其果味甘性温，具备解暑止渴、消食止泻之功，为夏令医食兼优的气节佳果。别的，菠萝皮中富含菠萝酶，有丰硕的药用代价，据外洋专家20多年测验测验，持久食用菠萝皮，心脑血管生物论文，糖尿病病发率较着降落，并有必然的抗癌功效。
最近几年来份子生物学的成长和各类份子标记手艺不时显现，使得动物遗传阐发研讨得以敏捷成长，此中以SSR标记在动物遗传研讨上操纵最为普遍。跟着测序手艺本钱的降落，GenBank中大批的动物EST数据为SSR份子标记的开辟供给了新的路子[2]中国学术期刊网。EST-SSR除具浅显SSR份子标记特色外，另有信息量大，通用性好，开辟简略、疾速、本钱高等[3]的出格上风。今朝良多作物如西瓜[4]、苹果[5]、香菇[6]、甘蔗[7]已开辟大批的EST-SSR，并操纵于遗传作图、遗传多样性[8]等研讨上，但在菠萝种植种上至今还不见从EST中开辟SSR的相干报道。
本研讨对现有菠萝EST中SSR信息停止周全阐发，以大白菠萝EST-SSR产生频率和特色，为进一步成立EST-SSR标记并摸索其在菠萝研讨中的遗传作图、育种资料评估、种类判定等的操纵奠基底子。
1 资料与体例
1.1 资料
收罗菠萝幼嫩的叶片于-20℃保管。
1.2 菠萝EST的获得及EST-SSR序列查找
从美国国度生物手艺中间(National Center for Biotechnology Information，NCBI)的动物基因组数据库(ncbi.nlm.nih.gov/genomes/PLANTS/PlantList.html)共搜刮到5659条菠萝的EST序列。操纵Websat（wsmartins.net/websat/）在线法式搜刮EST-SSR。搜刮的规范为:二核苷酸、三核苷酸、四核苷酸、五核苷酸和六核苷酸反复序列的反复次数别离大于或即是9、6、5、4和3。
1.3 EST-SSR引物假想
操纵Primer Premier 3.0在线法式对包罗有SSR的EST假想引物生物论文，引物假想的准绳为EST序列长度大于100 bp，SSR序列的起头和竣事地位别离距5'和3'端不少于20 bp。引物假想的首要参数为：引物长18~27bp，最适为22bp；引物退火温度Tm值57~60℃，下流与下流引物的Tm值相差±1℃；PCR预期产品长100~400bp；尽可能防止引物二聚体，发夹计划和错配等。按反复典范的比例挑选30对引物由上海生物工程手艺办事无限公司分解。
1.4 EST数据冗余阐发
操纵VecScreen(ncbi.nlm.nih.gov/VecScreen)及RepeatMasker(repeatmasker.org)去除载体净化和反复序列,对那些能假想出引物的EST序列，最初经由进程Tm值和引物序列比对进一步删除冗余序列。
1.5 DNA提取
接纳改进CTAB法[9]提取菠萝的基因组DNA中国学术期刊网。
1.6 PCR扩增、电泳检测
PCR反应体系（25μl)：10×buffer 2.5μl，Mg2+ 25mmol/L 1.5μl， dNTP10mmol/L 0.5μl，引物100μmol/L1μl，Taq酶5.0U 0.2μl，模板DNA 20ng/μl 3μl。
反应法式为：94℃预变性5分钟，94℃变性30秒，51℃退火40秒生物论文，72℃耽误50秒，38个轮回，72℃终耽误7分钟，8℃保管。
PCR产品用6%非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳停止分手检测，120 V电压电泳1.5 h后，接纳银染法染色，BIO-RAD Gel Doc2000凝胶成像体系中成像。
1.7 SSR位点的功效阐发
对挑选出的SSR提取其地点的基因序列，观点性翻译成卵白质序列后，操纵Blastp比对，提取近似性最高的序列正文信息，作为SSR靶向基因的功效正文，并对SSR位点的正文信息停止分类。
2 功效与阐发
2.1 菠萝EST-SSR的频率和散布密度
在5 659条EST序列中，颠末挑选共发明SSR序列636个生物论文，占全数EST数据库的11.24%，标明菠萝中的EST-SSR很是丰硕。经计较去除冗余后的菠萝EST序列总长约为4.7×106bp，菠萝SSR散布密度为均匀7.39 kb EST就存在一条SSR(表1)，并且差别反复典范的均匀间隔有较着差别，EST-SSR显现频率越高其均匀间隔则越小。菠萝EST-SSR中含有二核苷酸、三核苷酸、四核
苷酸、五核苷酸、六核苷酸反复的序列别离占EST数据库中发明SSR序列总数的42.61%(271/636)、29.25%(186/636)、3.46%(22/636)、4.56%(29/636)、20.13%(128/636)(表1)，申明菠萝EST-SSR的上风反复单位为二核苷酸、三核苷酸和六核苷酸，三者共占EST-SSR总数的91.98%。此中二核苷酸反复的显现频率（42.92%）较着高于其余典范，三核苷酸（28.93%）和六核苷酸（20.13%）反复的显现频率也绝对较高。反复典范为四核苷酸、五核苷酸的反复所占的比例比拟小，只占总SSR的8.02%。
表 1 菠萝中EST-SSR的数目、比例、显现频率与均匀间隔
Table 1Number,Proprotion,frequency and mean distance of EST-SSR inpineapple
反复典范
Repeat type
SSR数目
Number of SSR
所占总SSR比例/%
Proprotion in all SSRs
显现频率/%
Frequency
均匀间隔/kb
Mean distance
二核苷酸Dinucleotide
271
42.61%
4.79%
17.34
三核苷酸
Trinucleotide
186
29.25%
3.29%
25.27
四核苷酸
Tetranucleotide
22
3.46%
0.39%
213.64
五核苷酸
Pentanucleotide
29
4.56%
0.51%
162.07
六核苷酸
Hexanucleotide
128
20.13%
2.26%
36.72
合计Total
636
100%
作者简介：王雪梅(1976-)，女，重庆永川人，副研讨员，首要处置迷信计量学、GIS与文献计量学集成研讨.
资本与情况迷信以人类保存和成长所依靠的地球体系出格是地球表层体系的特色和变更纪律为首要研讨工具，研讨内容触及地球迷信及其分支学科，和性命迷信、化学、工程与资料迷信、信息迷信及办理迷信的诸多分支学科范畴。经济疾速成长对资本情况迷信提出了庞大需要，中国迷信院环绕我国经济社会成长的严重标题标题标题标题标题题目及其相干的资本情况与地球迷信标题标题标题标题标题题目，在资本情况和地球迷信范畴获得了一系列研讨功效［1～3］。操纵WebofKnowledge平台SCI-E数据库，对2009—2014年中国迷信院SCI论文及地球迷信与资本情况迷信范畴论文产出停止统计，并与环球及中国论文产出比拟拟，体会中国迷信院在地球迷信与资本情况迷信范畴的研讨产出及其成长状态。
1数据来历与阐发体例
从WebofScience的251个学科分类中挑选出与地球迷信、情况/生态学相干的学科，按照学科分类在ScienceCitationIndexExpanded(SCI-E)数据库检索资本情况迷信范畴的相干论文，操纵美国汤森路透公司的ThomsonDataAnalyzer文本发掘软件停止数据阐发和制图，对环球和中国的资本情况迷信范畴产出停止统计阐发。
地球迷信(Geosicence)范畴包罗：动力与燃料(Energy&Fuels)、地质工程(Engineering，Geological)、煤油工程(Engineering，Petroleum)、地球化学与地球物理学(Geochemistry&Geophysics)、地舆学(Geography)、地质学(Geology)、地球迷信多学科(Geosciences，Multidisciplinary)、湖泊学(Limnology)、景象形象与大气迷信(Meteorology&AtmosphericSciences)、矿物学(Mineralogy)、矿产与矿物加工(Mining&MineralProcessing)、陆地学(Oceanography)、古生物学(Paleontology)、遥感(RemoteSensing)、水资本(WaterResources)；情况/生态学(Environment/Ecology)范畴包罗：泥土迷信(SoilScience)、生态学(Ecology)、陆地工程(Engineering，Marine)、情况迷信(EnvironmentalSciences)。
2015年2~3月在SCI-E数据库对环球、中国、中国迷信院的SCI论文产出停止检索和统计，中国迷信院检索规模包罗签名中有“中国迷信院”的论文，包罗中国迷信院各研讨所及中国迷信院大学(中国迷信院研讨生院)，不包罗未签名“中国迷信院”的中国科技大学论文。
2中国迷信院论文产出全体态势
2009—2014年时代，SCI-E共收录论文955.6万篇，此中签名中国的论文有113万篇，签名中国迷信院的论文有15万篇。图1反应了环球、中国、中国迷信院2009—2014年年度论文产出质变更。环球、中国、中国迷信院的SCI论文别离以年均2%，14%和10%的速率增添。2014年与2009年比拟，环球SCI论文增添近11%，中国增添约为93%，而中国迷信院增添了62%，由图2可见中国SCI论文增添速率远高于环球论文增添速率。
图3统计了中国SCI论文占环球百分比和中国迷信院SCI论文占中国百分比，标明中国论文占环球的份额延续回升，而中国迷信院论文占中国的份额则渐渐有所降落，但中国迷信院资本情况类研讨所颁发的SCI论文数目占中国迷信院的份额稳中有升。从图2也可见，中国迷信院资本情况类研讨所2014年与2009年比拟，SCI论文增添了约92%，与中国SCI论文的增速很靠近，高于中国迷信院全体的论文增添速率。
将2009—2014年情况/生态学和地球迷信范畴各年论文按照被引频率凹凸统计TOP1%，TOP10%，TOP20%和TOP50%论文的数目，和中国和中国迷信院响应级次TOP论文的数目，并统计中国占环球的比例和中国迷信院占中国的比例(图4)。
按照论文全数著者统计的功效标明，中国在环球资本情况迷信研讨范畴各级次TOP论文中的比例根基为15%~20%，中国地球迷信范畴TOP论文数占环球的比例高于情况生态学范畴，并且地球迷信范畴TOP1%的高程度论文比例很高。中国迷信院在中国资本情况迷信研讨范畴各级次TOP论文中的比例为26%~32%，中国迷信院情况/生态学范畴TOP论文数占中国的比例高于地球迷信范畴。
3资本情况迷信范畴的重点研讨标的目标
基于SCI学科分类，别离对2009—2014年环球SCI论文最多的20个学科范畴的论文数占环球SCI论文总数的比例、中国SCI论文最多的20个学科范畴的论文数占中国SCI论文总数的比例，和中国迷信院SCI论文最多的20个学科范畴的论文数停止统计。功效显现，环球各学科范畴中，生物学与生归天学发文最多，发文最多的20个学科范畴首要侧重于医学和性命迷信等，比拟之下，中国产出侧重于资料迷信和化学、物理等相干学科范畴，中国迷信院在情况迷信方面论文产出数目比例较高。
资本情况迷信范畴论文产出占环球天然迷信范畴论文产出的8%摆布，中国该范畴论文产出占中国SCI论文比例靠近10%，中国迷信院该范畴论文产出占中国迷信院SCI论文比例约为20%(图5)。
2009—2014年，中国SCI论文占环球比例约为12%，而资本情况迷信范畴中国SCI论文占环球份额跨越14%。此中，情况迷信是环球、中国和中国迷信院资本情况迷信范畴论文产出的最首要的范畴。别的，中国在动力与燃料、遥感、地质学等方面论文产出占环球比例绝对较高，而在生态学、古生物学等方面所占比例较低。中国迷信院对古生物学方面的SCI论文在中国资本情况范畴论文中的比例最高，到达54%；别的，在泥土迷信、地舆学、湖泊学、生态学、景象形象与大气迷信等方面的论文占中国的比例也较高，但在煤油工程、陆地工程等方面所占比例较低，缺乏10%(图6)。
图7中，气泡的巨细表征资本情况各子范畴占环球资本情况迷信范畴论文产出份额的巨细，即点越大，该子范畴论文数在环球资本情况范畴中的比例越高；X轴表现资本情况子范畴中国占环球论文的百分比，值越高标明该子范畴中国占环球的比例越高；Y轴表现资本情况子范畴中国迷信院占中国论文的百分比，值越高标明该子范畴中国迷信院占中国的比例越高。气泡大的那些子范畴(如情况迷信等)是环球资本情况迷信研讨比拟多的热点标的目标；右下角的那些子范畴(如动力与燃料等)是中国资本情况迷信绝对比拟有上风的研讨标的目标；左上角那些子范畴(如古生物学等)是中国迷信院资本情况迷信绝对比拟有上风的研讨标的目标。
中国迷信院资本情况类研讨所2009—2014年颁发的SCI论文首要触及的学科范畴包罗：情况迷信、生态学、地质学、工程学、景象形象与大气迷信、农学、地球化学与地球物理学、化学、水资本、迷信与手艺、陆地与海水生物学、地舆学、动物学、陆地学等。
4首要研讨机构的迷信进献
中国迷信院几近一切的研讨机构都在SCI资本情况迷信范畴期刊颁发过论文，2009—2014年按照全数著者统计跨越100篇的研讨一切50多个，在资本情况迷信范畴颁发SCI论文较多的前10个研讨所见表1，这些较多的研讨所都属于中国迷信院资本情况类研讨机构。
2009—2014年中国迷信院27个资本情况类研讨以是第一著者颁发的SCI论文共有22032篇，此中，生态情况研讨中间、地质与地球物理研讨所、陆地研讨所、地舆迷信与资本研讨所、大气物理研讨所、广州地球化学研讨所、南海陆地研讨所、寒区旱区情况与工程研讨所等较多，第一著者的SCI论文数都在1000篇以上(表2)。
中国迷信院资本情况类研讨所论文的篇均被引次数为6.03次/篇，表2中的“表现不俗的论文篇数”统计的是这些研讨所高于基准值的论文篇数，即以后总被引次数除以从年至2014年的累历年获得的年均被引6次及以上的论文［4］。生态情况研讨中间、地质与地球物理研讨所、广州地球化学研讨所的表现不俗论文都在150~200篇。
中国迷信院资本情况类研讨所被引频率位于前10%的论文篇数，即研讨所2009—2014年被引16次及以上的论文篇数，也是生态情况研讨中间、地质与地球物理研讨所、广州地球化学研讨所最多，都在260篇以上。
参考中国迷信院文献谍报中间迷信前沿阐发中间假想迷信进献指数［5］，界说：
式中：Ci为中国迷信院资本情况类第i个研讨所迷信进献指数，P10%i为第i个研讨所被引前10%论文数目，Citedi为第i个研讨所论文被引总频率，n为中国迷信院资本情况类研讨所的数目。功效显现，生态情况研讨中间、地质与地球物理研讨所、广州地球化学研讨所、陆地研讨所、大气物理研讨所、地舆迷信与资本研讨所的迷信进献指数较高，都在0.1以上。
5论断与倡议
经由进程以上阐发能够或许或许或许看出：
(1)2009—2014年，中国迷信院SCI论文增添了62%，高于环球11%的增添率，低于中国93%的增添率，但中国迷信院资本情况类研讨所的SCI论文增添了约92%，与中国论文增速相靠近。
(2)中国在环球资本情况迷信研讨范畴各级次TOP论文中的比例根基为15%~20%，中国迷信院在中国资本情况迷信研讨范畴各级次TOP论文中的比例为26%~32%，中国迷信院情况/生态学范畴TOP论文数占中国的比例高于地球迷信范畴。
